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ELISA試劑盒中的酶
更新時間:2016-04-07   點擊次數:1778次

(1)HRP:是一種糖蛋白,含糖量約18%,分子量為44kD,在蔬菜作物辣根中含量很高。ELISA試劑盒HRP是一種復合酶,由主酶(酶蛋白)和輔基(亞鐵血紅素) 結合形成一種卟啉蛋白質。主酶為五色糖蛋白,在275nm波長處有zui高吸收峰;輔基是深棕色的含鐵卟啉環,是酶的活性基團,在403nm波長處有zui高吸收峰。HRP的純度用純度值(reinhartzahl,RZ)表示,RZ=A403nm/A275nm,即403nm的吸光度與280nm的吸光度之比,高純度HRP的RZ值應≥3.0。ELISA試劑盒HRP質量的另一重要指標是酶活力,以單位(unit,U)表示。用于標記的HRP比活性應≥250U/mg。HRP的作用底物為H202,催化下列反應;
DH2+H202  HRP  D+2H2O
(2)ALP:是一種磷酸酯的水解酶,用做示蹤酶的ALP活性應在l 000U/mg以上。ALP常用的底物為對硝基苯磷酸鹽(PNP),降解產物為的對硝基酚。經NaOH終止酶反應后,顏色維持比較穩定。
ELISA試劑盒中酶作用于底物后生成有色物質、熒光物質或導致化學發光,分別可用分光光度計、熒光光度計測量及照度計測量。熒光和化學發光測定的敏感度均高于比色測定,標準曲線的線性范圍亦較比色反應寬,測定效果優于常用的比色ELISA試劑盒。

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